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II　滅菌法・消毒法概説

II 章 参考文献

2．主な滅菌法

１）加熱法 ^{2、3、10）}

熱によって微生物を殺滅する方法であり、熱に安定な被滅菌物に適用されるが、その効果は加熱を受ける温度と時間によって変化する。被滅菌物の種類、性状や容器の収納状態などによって加熱の受け方は異なってくるので、滅菌装置の内部全体（被滅菌物の入った収納容器を含む）の温度や圧力が設定条件に達したことを確認してから、滅菌時間を計測しなければならない。

（1）高圧蒸気滅菌法

密封された装置内で、熱に安定な被滅菌物を対象にして適当な温度および圧力の飽和水蒸気で加熱することによって微生物を殺滅する方法である。本法はチャンバ（内缶）の空気と飽和蒸気が完全に置換することが重要で、被滅菌物すべてに飽和水蒸気が達することが必要である。この方法の利点は、急速に加熱できて、被滅菌物の深部にまで熱が素早く浸透して、耐熱性の芽胞形成菌を含め、すべての微生物を比較的短時間で確実に殺滅することができる点である。さらに、乾熱法に比べて、多くの器具、物品類、液状物質に適用可能であり、これらの材質劣化や変質なども比較的少なく、医療機関や医薬品製造現場で汎用されている。

通常、高圧蒸気滅菌装置（オートクレーブ）を用いて、被滅菌物の種類や材質に応じてそれに適した温度、時間等が適用されるが、オートクレーブチャンバ（内缶）の設定温度到達時間と被滅菌物のコールドスポットでの到達時間との間には、タイムラグがあることが多いので、事前に確認して運転条件の設定に反映しなければならない。オートクレーブチャンバ（内缶）に収納する被滅菌物の容積は、缶内体積の約60％を目安とし、詰め込み過ぎないようにする注意が必要である。湿熱滅菌法評価の指標菌には Geobacillus stearothermophilus（以前は Bacillus stearothermophilus）を用いる。通例、設定されている温度・時間条件は、表２のとおりである。

表２　通例設定されている温度・時間条件（高圧蒸気滅菌法）

（2）乾熱法

適当な温度の乾熱空気中で加熱して、被滅菌物に存在する微生物を殺滅する方法である。高圧蒸気法に比して殺滅効果は劣るが、大規模な装置を必要としない利点があり、乾燥状態で滅菌操作が要求される場合に利用されている。通例、ガラス製、磁製、金属製等の熱に安定な被滅菌物を対象として、160〜190℃の温度を用いて行われている（表３）。本法による殺滅効果は、一般細菌や真菌は殺滅できるが芽胞形成菌の中には、300℃、30分でも生残するものもあるので注意を要する。また、乾熱法は条件を変えることによってエンドトキシン除去法としても利用できる。250℃で少なくとも１時間の乾熱処理でエンドトキシンを破壊することができるとされている。乾熱滅菌法評価の指標菌には Bacillus atrophaeus DSM 675（以前は Bacillus subtilis DSM 675）を用いる。

表３　通例設定されている温度・時間条件（乾熱法）

（3）火炎法

火炎中で加熱することにより微生物を殺滅する方法である。最も確実な滅菌法であるが、被滅菌物を損傷するので、排泄物や実験動物などの処理法として用いられている。また、細菌検査室などで用いる白金耳などの滅菌にも利用されている。

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